如何用紫外吸收法测定DNA含量? 紫外吸收法测定DNA含量,组成核酸分子的碱基,均具有一定的吸收紫外线特性,最大吸收值在波长为250~270nm之间。核酸的最大吸收波长是260nm,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。在波长260nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml;单链DNA或RNA为20μg/ml。可以次来计算核酸样品的浓度。分光光度法不但能确定核酸的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的紫外线吸收值的比值(A260/A280)估计核酸的纯度。DNA的比值为1.8,RNA的比值为2.0。若DNA比值高于1.8,说明制剂中RNA尚未除尽。RNA、DNA溶液中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。当然也会出现既含蛋白质又含RNA的DNA溶液比值为1.8的情况,所以有必要结合凝胶电泳等方法鉴定有无RNA。或用测定蛋白质的方法检测是否存在蛋白质。紫外分光光度法只用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液。对于很稀的溶液可采用荧光光度法。生物帮上面有相关的方法步骤的,大脑模型 http://product.bio1000.com/100057/

怎样用紫外分光光度计测DNA质量和浓度?

用分光光度计测DNA、RNA的浓度 最低0.27元开通文库会员,查看完整内容>;原发布者:ryp923用分光光度计测定质粒DNA的浓度一、目的熟练掌握分光光度法检测DNA纯度和浓度的方法。二、原理DNA或RNA链上碱基的苯环结构在紫光区具有较强吸收,其吸收峰在260nm处。波长为260nm时,DNA或RNA的光密度OD260不仅与总含量有关,也随构型而有差异。对标准样品来说,浓度为1μg/ml时,DNA钠盐的OD260=0.02当OD260=1时,dsDNA浓度约为50μg/mlssDNA浓度约为37μg/mlRNA浓度约为40μg/ml寡核苷酸浓度约为30μg/ml(youyu底物不同有差异)当DNA样品中含有蛋白质、酚或其他小分子污染物时,会影响DNA吸光度的准确测定。一般情况下同时检测同一样品的OD260、OD280和OD230,计算其比值来衡量样品的纯度。经验值:纯DNA:OD260/OD280≈1.8(>1.9,表明有RNA污染;6,表明有蛋白质、酚等污染)纯RNA:1.7(时表明有蛋白质或酚污染;2.0时表明可能有异硫氰酸残存)若样品不纯,则比值发生变化,此时无法用分光光度法对核酸进行定量,可使用方案二的方法或其他方法进行估算。三、材料、试剂及器具1、材料提取的PUC19样品、PUC19标准样品2、试剂灭菌重蒸水,TE缓冲液四、操作步骤1、UV-240紫外分光光度计开机预热10min.2、用重蒸水。

如何用紫外分光光度计测DNA浓度 首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。。

紫外分光光度法测dna浓度 用分光光度计测DNA、RNA的浓度

电泳法和紫外分光光度法检测DNA的浓度和纯度,哪种方法更好 两种方法各有优bai劣。电泳du法更直观,如果你有DNA Maker,并zhi且知道Maker的浓度dao,就可以使回用一维条带分析软答件如Quantity One分析样品中DNA的含量,而且可以很直观地了解目的DNA的纯度、大小等特性。但是,由于电泳中染色特异性很强,对DNA、RNA之外的小分子污染情况无法检测。紫外法可对样品中所有具紫外吸收特性的物质给出一个综合的结果。因此如果样品中有其他影响DNA后续操作的物质,样品吸光值就会有很大偏移。值得注意的是,紫外法仅可作为一个参考,吸光值是结果,而不是原因。吸光值符合要求并不能代表DNA纯度符合要求。一般紫外分析后还是要跑个电泳,两者结合就可靠多了。